Karnovsky's Paraformaldehyd/Glutaraldehyd Fixativ, verschiedene Verpackungseinheiten

Das Fixativ nach KARNOVSKY findet seine Verwendung oft in der Elektronenmikroskopie. Das ursprüngliche, von Dr. M. Karnovsky entwickelte Fixiermittel, war mit seiner Mischung aus 5 % Glutaraldehyd und 4 % Paraformaldehyd in 0,1 M Cacodylat-Puffer extrem hypertonisch.
Dieses Fixiermittel wurde später für niedrigere Aldehydkonzentrationen und sogar die Verwendung von Phosphatpuffer modifiziert. Tatsächlich ist der Name „Karnovsky’s“ heute ein allgemeiner Begriff für jedes Fixiermittel, das sowohl Glutaraldehyd als auch Paraformaldehyd in verschiedenen Konzentrationen in einem Puffer Ihrer Wahl enthält. Diese Mischung führt zu einer besseren Gewebedurchdringung im Vergleich zu den Einzelverbindungen.
In der Kombination wird erst die Zellultrastruktur mit Paraformaldehyd schnell stabilisiert, da dieses kleine Monokohlenstoff-Aldehyd schnell in Gewebe eindringt und Proteine durch Reaktion mit ihrer Alpha-Amino-Gruppe denaturiert. Glutaraldehyd ist ein größeres Dialdehyd mit fünf Kohlenstoffatomen, welches eine langsamere Penetrationsrate (ca. 1 mm/h) aufweist, aber Proteine mit den beiden Aldehydgruppen vernetzt, wodurch die Struktur besser stabilisiert wird und eine mögliche Extraktion während der nachfolgenden Verarbeitungsschritte verringert wird. Die Stabilisierung der zellulären Proteine, die schnelle Gewebedurchdringung und die optimale Konservierung sind die größten Vorteile der Karnovsky-Lösung.

Using Paraformaldehyde-Glutaraldehyde Solution (Karnovsky's Fixative)

Kit contains

• 2 x 10 ml 16% Paraformaldehyde Solution
• 1 x 10 ml 50% EM Grade Glutaraldehyde
• 1 x 50 ml Sodium Phosphate Buffer .2M, pH 7.2

Mixture 1 (Original Karnovsky's Mixture)

• 16% Paraformaldehyde Solution 20 ml
• 50% Glutaraldehyde EM Grade 8 ml
• 0.2M Sodium Phosphate Buffer 25 ml
• Distilled Water 25 ml

Final mixture is 78 ml with 5% Glutaraldehyde, 4% Formaldehyde in 0.064M buffer. This mixture is extremely hypertonic, with an osmolarity of more than 2000m OSM .

Mixture 2

A lower concentraction of Glutaraldehyde and Formaldehyde especially used for vascular profusion.

• 16% Paraformaldehyde Solution 13 ml
• 50% Glutaraldehyde EM Grade 5 ml
• 0.2M Sodium Phosphate Buffer 50 ml
• Distilled Water 32 ml

Final mixture is 2% Paraformaldehyde, 2.5% Glutaraldehyde and 0.1M Buffer. If necessary, the osmolarity can be adjusted by adding sucrose to NaCl. The pH may also need to be adjusted to your desirable point. This mixture is the most effective general fixative for both plant and animal specimens.